https://wodolei.ru/catalog/vodonagrevateli/nakopitelnye-50/ploskie/ 

 

На втором этапе методом иммунноблоттинга (Western blot) проводится определение антител к отдельным белкам вируса.

Иммуноферментный анализ.
Принцип иммуноферментного анализа основан на выявлении комплекса антиген – антитело с помощью фермента (пероксидаза, щелочная фосфатаза и др.) по изменению окраски специфического субстрата. Основной компонент твердофазных иммуноферментных тест-систем – полистироловый планшет с лунками или полистироловые шарики, на поверхности которых сорбирован антиген: вирусный лизат, рекомбинантные белки или синтетические антигенные детерминанты. Из всех модификаций твердофазного ИФА для диагностики инфекции, вызываемой ВИЧ, наиболее широко применяют непрямой и контактный варианты.

Принципы постановки непрямого метода ИФА.
Предварительно приготовленный согласно инструкции, прилагаемой к набору, исследуемый материал (сыворотка, плазма) вносится в лунку планшета. Если этого требует методика, планшет предварительно отмывается. Несколько лунок планшета заполняют контрольными сыворотками, содержащими и не содержащими антитела к ВИЧ. При работе с контрольными сыворотками необходимо строго соблюдать инструкции по применению диагностической тест-системы, т. к. интерпретация результатов зависит от значений оптической плотности контрольных сывороток. Планшет с внесенными контрольными сыворотками и исследуемым материалом инкубируется при условиях, указанных в инструкции, прилагаемой к диагностическому набору. Если специфические антитела присутствуют в сыворотке, они образуют комплекс с антигеном, сорбированным на поверхности лунок планшета. Несвязавшиеся с антигеном антитела удаляются при отмывке планшета.
Затем во все лунки планшета вносят конъюгат-антитела против иммуноглобулинов человека, меченные ферментом (пероксидаза, щелочная фосфатаза и др.). При последующей инкубации происходит образование комплекса антиген – антитело – конъюгат. Несвязавшийся конъюгат удаляется во время отмывки планшета. Наиболее широко применяемым индикаторным ферментом для ИФА служит пероксидаза хрена. Субстраюм для нее служит перекись водорода.
Эта реакция протекает без видимых проявлений. Изменение окраски раствора происходит при окислении красителей (ортофени-лендиамина или др.), которые входят в состав субстратного раствора. Краситель из восстановленной формы переходит в окисленную окрашенную форму. Таким образом происходит окрашивание только тех лунок, в которых присутствует комплекс антиген – антитело – конъюгат. Иногда окрашивание может быть результатом неспецифического связывания иммуноглобулинов с антигенами ВИЧ. Учет реакции проводят на спектрофотометре (ридере) при длине волны, указанной в инструкции, прилагаемой к диагностическому набору. Длина волны зависит от красителя, используемого в тест-системе.
При постановке ИФА в случае получения положительного результата анализ проводится еще 2 раза (с той же сывороткой). При получении хотя бы еще одного положительного результата сыворотки направляют в референс-лабораторию.

Иммунный блоттинг.
В настоящее время для подтверждения специфичности первичного положительного результата чаше всего используется метод иммунноблоттинга. Принцип метода заключается в выявлении антител к определенным белкам вируса, иммобилизованным на нитроцеллюлозную мембрану. В организме человека образуются антитела к ряду компонентов вируса.
Подготовка нитроцеллюлозных мембран для тест-системы производится следующим образом. На первом этапе производят разделение белков ВИЧ по молекулярной массе с помощью электрофореза в полиакриламидном геле. Белки мигрируют в слоях геля при наложении электрического потенциала: белки с низкой молекулярной массой проходят через поры в полиакриламидном геле легче, чем белки с высокой молекулярной массой и быстрее достигают конца геля. В результате этого происходит разделение белков на отдельные полосы по молекулярной массе. Затем осуществляется электрофоретический перенос из полиакриламидного геля на поверхность нитроцеллюлозной мембраны. После этого мембрану обрабатывают блокирующим раствором во избежание неспецифического связывания иммуноглобулинов сыворотки крови, затем отмывают, высушивают и разрезают на отдельные полоски, которые вкладываются в набор. Перенесенные таким образом белки выявляются на нитроцеллюлозной реплике (блоте) с помощью непрямого анализа, а именно: сыворотка или плазма инкубируются с блотом; если исследуемый материал содержит антитела к белкам ВИЧ, они связываются с антигеном, перенесенным на нитроцеллюлозную мембрану, после отмывки полоски блота инкубируются с конъюгатом; при образовании комплекса антиген – антитело, конъюгат присоединяется к нему, после отмывки от конъюгата и инкубации с субстратом происходит окрашивания тех участков нитроцеллюлозы, где произошло образование комплекса антиген – антитело – конъюгат. Полученный результат сравнивается с результатами тестирования положительной и отрицательной контрольных сывороток.
Результаты, полученные в иммунном блоттинге интерпретируются как положительные, сомнительные и отрицательные.


Терапия ВИЧ-инфекции

Основные принципы терапии больных ВИЧ-инфекцией.
Создание охранительного психологического режима. Своевременное начало этиотропной терапии. Тщательный выбор лекарственных препаратов с подбором необходимого минимума. Ранняя диагностика вторичных заболеваний и их своевременное лечение.
Задачи:
На стадии первичных проявлений и в периоды ремиссии на стадии вторичных заболеваний предотвратить или отсрочить развитие угрожающих жизни поражений.
На стадии вторичных заболеваний, особенно ЗБ, 3В, в период клинической манифестации с помощью рациональной терапии вторичных заболеваний продержать больного до момента, когда с помощью специфической противоретровирусной терапии (АЗТ) удастся добиться временного восстановления иммунного статуса организма.

Этиотропная терапия.
Базисная этиотропная терапия больных ВИЧ-инфекцией включает противоретровирусную терапию (направленную на подавление репликации ВИЧ) и химиопрофилактику вторичных заболеваний.
Противоретровирусная терапия.
Препаратом для этиотропной терапии ВИЧ-инфекции, разрешенным для клинического применения в России является азидотимидин (АЗТ, AZT), который выпускается под коммерческими названиями тимозид (Ассоциация «АЗТ», Россия) в капсулах по 0,1 г., и Retrovir, Zidovudine (Wellcome, Великобритания) в капсулах по 0,1 г и 0,25 г, в форме сиропа. Препарат применяется перорально в суточной дозе 0,6 г (детям из расчета 0,01 г/кг) в 3 приема. При обусловленных ВИЧ поражениях нервной системы доза удваивается. При плохой переносимости препарата суточная доза может быть снижена до 0,3 г. Более низкие дозы неэффективны. В форме сиропа препарат назначается больным, которые не могут глотать капсулы (маленькие дети, больные с эзофагитом). АЗТ назначается по непрерывной схеме или курсами продолжительностью не менее 3 мес. Во избежание развития анемии и нейтропении лечение АЗТ проводится под контролем общего анализа крови, проводимого каждые 2 нед первые 2 мес лечения и в последующем ежемесячно.
Противоретровирусная терапия назначается по клиническим показаниям в стадии 2А, ЗА, 3В, 3В в период клинической активности до исчезновения клинической симптоматики, но не менее, чем на 3 мес.
При отсутствии клинической симптоматики (т. е. в период клинической ремиссии) проводится поддерживающая Противоретровирусная терапия, назначаемая по клиническим и иммунологическим показаниям. При уровне CD4"200 она проводится по непрерывной схеме, при CD4"500, но "200 – курсами по 3 мес с 3-месячными интервалами. При неизвестном уровне CD4 в стадии первичных проявлений (2) и в стадии ЗА поддерживающая терапия не проводится, в стадии ЗБ проводится по курсовой и в стадии 3В по непрерывной схеме.
Вакцинопрофилактика у пациентов с ВИЧ-инфекцией Вакцинация осуществляется под наблюдением врачей-педиатров Центров борьбы со СПИД. В поствакцинальном периоде проводится патронаж ребенка на 3-4-е и 10-11-е сутки. При возможности, осуществляется госпитализация ребенка в поствакцинальном периоде. Перед вакцинацией за 1-2 нед целесообразно назначать поливитамины, содержащие витамин А.
Профилактика вторичных заболеваний.
Профилактика вторичных заболеваний у больных ВИЧ-инфекцией проводится по эпидемиологическим, клиническим и иммунологическим показаниям.
Профилактика пневмоцистной пневмонии:
Профилактика пневмоцистной пневмонии проводится больным ВИЧ-инфекцией с уровнем CD4 лимфоцитов ниже 200 в ммі (первичная профилактика) и больным, ранее перенесшим пневмоцистную пневмонию (вторичная профилактика). При неизвестном уровне CD4 профилактика пневмоцистной пневмонии проводится больным в стадии ЗБ в период клинической активности при наличии легочной патологии, а также всем больным в стадии 3В. Препаратом первого ряда является Trimetoprim+Sulfamethoxazole (Biseptol 480 или Septrin У2Вдля взрослых, Biseptol 120, Septrin H4B для детей). Для первичной профилактики назначают 3 дня подряд каждую неделю по 1 таблетке взрослым, детям – уменьшенную дозу соответственно массе тела.
Для вторичной профилактики в течение 4 нед после окончания курса лечения острого процесса препарат принимают ежедневно по 1 таблетке, затем при отсутствии отрицательной клинической и рентгенологической динамики переходят на схему первичной профилактики. При признаках активации пневмоцистной инфекции (появление или усиление одышки, усиление интерстициальных изменений в легких) переходят на ежедневный прием препарата. При непереносимости бисептола может применяться дапсон (Dapsone) по 0,05 г в сутки ежедневно.
Профилактика грибковых инфекций:
Грибковые поражения, преимущественно кандидозной этиологии, встречаются у больных ВИЧ-инфекцией наиболее часто. Первичная профилактика грибковых поражений осуществляется при проведении больным ВИЧ-инфекцией антибиотикотерапии.
Рекомендуются следующие схемы химиопрофилактики грибковых поражений у больных ВИЧ-инфекцией: № 1 – нистатин 2,0 в сутки ежедневно; № 2 – нистатин 4,0 в сутки ежедневно (не более 10 дней); № 3 – кетоконазол 0,2 ежедневно; № 4 Флуконазол 0,15 один раз в неделю; № 5 Флуконазол 0,05 ежедневно. Профилактику начинают со схем, имеющих меньший номер, и при отсутствии или потере эффекта переходят на следующую. В стадиях 2А, 2Б, 2В, ЗА при CD4"200 или ЗБ и CD4"200 начинают со схемы № 2. В стадии ЗБ при CD4"200 и в стадиях 3В, 4 – со схемы № 3. При неизвестном уровне CD4 в стадии первичных проявлений (2) профилактику начинают со схемы № 1, в стадии вторичных заболеваний ЗА – со схемы № 2, в стадии ЗБ – со схемы № 3, в стадиях ЗВ-4 – со схемы № 5. При применении схемы № 3 следует помнить о гепатотоксичности кетоконазола и нежелательности его сочетания с другими гепатотоксичными препаратами и у больных с поражениями печени. При появлении признаков грибковой инфекции на фоне химиопрофилактики препарат назначают в лечебных дозах.
Профилактика микобактериозов:
Первичная профилактика туберкулеза проводится лицам с положительной пробой Манту лицам, имевшим контакт с больными открытыми формами туберкулеза, больным с уровнем CD4"200. При уровне CD4" 100 или неизвестном применяется изониазид по 0,3 в с\тки. При CD4" 100 из-за повышения вероятности развития атипичных микобактериозов – рифампицин по 0,3 г в сутки.


ВИЧ-инфекция и беременность

По данным СДС, САНАМ (1998), от 15 до 25% детей, рожденных от инфицированных матерей, заражены ВИЧ, а вирус может передаваться от инфицированной матери при кормлении. Препарат зидовудин, назначаемый матери при позднем сроке беременности, во время родов, а также в первые 6 мес младенцу снижает риск передачи на 8-25%. Инфицированным женщинам рекомендуют отказываться от грудного вскармливания. Для предупреждения перинатальной передачи ВИЧ от матери к плоду назначают пероральный прием зидовудина между 14 и 34 нед гестации, внутривенное введение препарата во время родов и сироп с зидовудином новорожденному. Проводится испытание с оценкой эффективности препаратов диданозина, индивара, ламивудина, саквинавира, ставудина и зальцитабина во время беременности.


ВИЧ-инфекция у детей и младенцев

Тесты на антитела к ВИЧ в плазме крови положительны как у инфицированных, так и неинфицированных младенцев, рожденных от серопозитивных матерей. Подтверждение ВИЧ-инфекции у младенцев в возрасте менее 18 мес культуральным методом, ДНК-диагностикой или детекцией антигена. Количество СД4+ лимфоцитов значительно выше у младенцев и детей до 5 лет, чем у здоровых взрослых, что должно соответственно интерпретироваться. Следует избегать вакцинации против полиомиелита пероральной живой вакциной, если ребенок ВИЧ-инфицирован или в тесном контакте с ВИЧ-инфицированным.
См. Руководство по лечению заболеваний, передаваемых половым путем. U.S. СДС. Изд. Венера-пресс, САНАМ, 1998. Ред. К.К. Борисенко.


Меры профилактики ВИЧ-инфекции в медицинских учреждениях

ВИЧ-инфекция является инфекционным заболеванием с достаточно ограниченным числом возможных путей передачи, из знания которых и надо исходить при работе с больными. При обычном физикальном осмотре никаких дополнительных мер защиты не требуется, если на коже рук нет повреждений. Если таковые имеются, их необходимо заклеить пластырем. При работе с биологическими субстратами больных ВИЧ-инфекцией или проведении манипуляции необходимо применять меры в соответствии с временными инструктивно-методическими указаниями Минздрава РФ «Организация мероприятий по профилактике и борьбе со СПИД в РСФСР» от 22.08.91 г.
Наиболее реальная опасность заражения возникает при разрывах и проколах перчаток, что может привести к попаданию зараженного материала на кожу, возможно имеющую микротравмы, и особенно при уколах и порезах.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55


А-П

П-Я